| １． |
Improvement of in vitro development of cloned NIBS miniature pig embryos by SCNT
Shimatsu, Y., Horii, W., Sano, J., Saitoh, T. and Nunoya, T.
Nippon Institute for Biological Science
The 59th Annual Meeting of the Japanese Association for Laboratory Animal Science 2012
Abstract: The purpose of this study was to improve in vitro development of cloned NIBS (Nippon Institute for Biological Science) miniature pig embryos by somatic cell nuclear transfer (SCNT). Fresh pig ovaries were obtained from local slaughterhouses and oocytes were cultured in Medium 199. The first polar body and the metaphase-II chromosomes of oocytes were removed in HEPES-buffered Medium 199 and single fibroblast cells were transferred into the perivitelline space of oocytes. Fibroblast cells were isolated from a 30-day fetus of the NIBS miniature pig. The embryos were removed in a mannitol-based solution, and fused and activated with an electric stimulus and two different chemical stimuli. In the first experiment, the embryos received a stimulus of 2 mM 6-dimethylaminopurine (6-DMAP) for 0, 0.5, 1, 2 or 3 h in PZM-5 and were cultured up to 168 h. The chemical stimulus of 2 mM 6-DMAP encouraged in vitro development of embryos. In next series of experiments, the embryos received a stimulus of 5 or 50 nM Trichostatin A (TSA) in addition to 2 mM 6-DMAP for 1 h and TSA alone for 17, 20 or 23 h, and were maintained in vitro culture in PZM-5. The stimulus of 5 nM TSA in addition to 2 mM 6-DMAP for 21 h brought more effective efficiency. These results suggest that the fusion/activation treatment by the chemical stimulus in addition to the electric stimulus is an effective approach in SCNT. |
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Evaluation of ECG parameters in NIBS miniature pigs using chargeable telemetry transmitter
Horii, W.1), Katagiri, K.1), Kuwahara, M.2), Sano, J.1), Saitoh, T.1), Doi, K.1)
and Nunoya, T.1)
1)Nippon Institute for Biological Science
2)Department of Comparative Pathophysiology, Graduate School of Agricultural and Life Sciences, The University of Tokyo
The 59th Annual Meeting of the Japanese Association for Laboratory Animal Science 2012
Abstract： The aim of this study is to obtain the ECG parameters in unanesthetized and unrestrained NIBS (Nippon Institute for Biological Science) miniature pigs, inspecting the usefulness of the telemetry system which containing the chargeable transmitter while implanting to animals. In the first experiment, the ECG of 4 NIBS miniature pigs were recorded continuously for 3 days using this telemetry system. RR interval was 646.3±68.3ms, PR interval was 138.0±16.0ms, QRS duration was 45.8±4.0ms, QT interval was 280.0±17.9ms, and heart rate was 95.2±11.0bpm. These values were about the same as those of the earlier report of miniature pigs. In the next, procainamide hydrochloride (PH) at 10 and 30mg/kg were intramuscularly administered to the animals. The ECG was recorded 3 h before administration to 24 h after administration, and influences on the ECG parameters were assessed. Although the shortening of RR and QT intervals were seen in 10mg/kg administration, these changes were not seen in 30mg/kg administration. In this study, we confirmed the usefulness of this telemetry system and obtained the ECG parameters in NIBS miniature pigs. Since dosage correlation was not seen in PH administration, we considered that further studies in more animals are needed.
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| ３． |
Development of an enzyme-linked immunosorbent assay of using lipopolysaccharides of Actinobacillus pleuropneumoniae serotype 15 as antigen for serological diagnosis in experimentally infected pig herds.
Lee, J., To, H., Tsutsumi, N. and Iwata, A.
Nippon Institute for Biological Science
22nd International Pig Veterinary Society Congress, 2012 (Korea)
Abstract: 【Introduction】Actinobacillus pleuropeumoniae(App) is a causative agent of swine pleuropneumoniae, which has a great responsible for economic loss in swine industry. The disease is highly contagious and survived pigs can become carriers. Detection and monitoring of App infections is important in control herds of free of the disease. App consists of 15 serovars, and serovar 15 has been proposed recently. In Japan, serovars 1, 2 and 5 have been the most prevalent ones. However, recently serovar 15 has been isolated from sporadic outbreaks of pleuropneumonia. Here we developed an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for serological diagnosis of serovar 15 and we evaluated the ELISA for antibody detection in experimentally infected pig herds. 【Materials and Methods】Lipopolysaccharide (LPS) was extracted by hot-phenol procedure as described previously from serovar 15 strain NBAP009 isolated from Japanese field. The extracted LPS was examined by SDS-PAGE and silver and/or CBB staining. Reactivity of the serovar 15 LPS with rabbit and pig sera to serovars 1, 2, 5, 3, 6, 8 and 15 were examined by ELISA and Western blotting. The ELISA was performed as described previously, using the extracted LPS as antigen. Cut-off value was set with 320 pig sera from App serovar 15-free farms. Twelve commercial pigs were purchased from a farm free of App. Pigs were challenged at 12 week-old, by intra-tracheal inoculation of 107 CFU/ 5mL of serovar 15 strain NBAP008. Survived pigs were euthanized at 7 days post-infection. Blood samples were collected just prior to challenge (from day 0), and euthanized; and the sera were examined by ELISA. Likewise, the serum samples from pigs infected with App serovars 1, 2 or 5 were prepared as describe elsewhere.【Results】The profile of LPS on SDS-PAGE showed smear on the top and ladder-like bands, which is a characteristic of LPS with O-polysaccharide repeating units in gram negative bacteria. We examined the LPS concentration for coating and reaction time in ELISA. The best result was obtained on coating with x100 dilution and reaction time was 10～20 min. Cut-off value was set at OD=0.2 by the mean OD+3SD. Cross-reactivity was examined using rabbit anti-sera to LPS extracted from App serovars 1-7 and 15. Positive signal was obtained with rabbit anti-sera against serovars 3, 6 and 15. There is no cross-reactivity between App serovar 15 LPS with pig sera infected with serovars 1, 2 and 5. The OD of these samples gave <0.2 indicating that the LPSs species didn’t share common epitopes. An indirect ELISA detected sero-conversion at post-challenge. Lethargy, respiratory distress and elevated rectal temperatures over 41℃ were observed at post-challenge as clinical signs. Post-mortem findings showed characteristic of App lesions in the lungs, supported by result of App isolation. 【Discussion and Conclusions】The objective of this study was to detect antibody to App using LPS extracted from a serovar 15 strain, which reported as a new serotype in Japan. The present result showed that the extracted LPS without protein contamination could be used as ELISA antigen. The ELISA showed no cross-reactive with serovars 1, 2 and 5, the most prevalent ones in Japan. As far as examined 238 field sera, there is no reaction of the LPS antigen with sera originated from other porcine infection. The serovar 15 LPS is reported to have cross-reactivity with serovars 3, 6 and 8. In Japan, these serovars have not yet isolated, therefore this ELISA could be used to survey the seroprevalence of serovar 15. Swinecheck® APP ELISA offered by Biovet Inc. is known as a commercially available ELISA kit, which detects antibodies by serovars 3, 6, 8 antigen. Unfortunately, the kit is unavailable in Japan where the serosurveillance of serovar 15 is highly desirable in the field. By this indirect ELISA, sero-conversion could be detected post-challenge with App serovar 15 strain. Furthermore, this ELISA is expected to be used to evaluate the potency of vaccine containing App serovar 15 as component. For practical uses, more investigations are required in field sera with natural infection of App serovar 15 and those of pigs vaccinated several App vaccines
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| ４． |
NIBS系ミニブタの腎機能に関する基礎データ
片桐公一1)、堀井渉1)、小野珠乙,2,3)、佐野順一1)、上塚浩司1)、斎藤敏樹1)、土井邦雄1)、
布谷鉄夫1)
1) 一般財団法人日本生物科学研究所，2)信州大学大学院総合工学系研究科，
3)信州大学農学部食料生産科学科
第39回日本毒性学会学術年会
要旨：ブタは食性や解剖学的所見がヒトと多くの点で類似している。特に腎臓はヒトと同様の構造を有していることから、他の動物種よりもヒトに近似した腎機能パラメーターを示すと考えられる。今回、我々はNIBS系ミニブタの腎機能に関する基礎データを検索したので報告する。
【材料・方法】NIBS系ミニブタ (6ヶ月齢、雌) 6頭を使用した。採尿ケージに1週間の馴化後、尿量・飲水量を4日間連続で測定し、4日目の24時間蓄尿を採取した。その後、全身麻酔下で採血した。血清中および尿中生化学値の測定を行い、尿中生化学値は体重当たりの排泄量を算出した。次に糸球体濾過率（GFR）の指標となるイオヘキソール血漿クリアランス（PCio）を求めた。イオヘキソール（ヨード量として90 mg/㎏）を単回静脈内投与し、血漿中のヨード濃度よりPCioを算出した。全ての検査終了後に剖検し、腎重量を測定した。
【結果および考察】血清中生化学値（mean±S.D.）はTP 6.0±0.2 g/dL、Cre 0.69±0.09 mg/dL、BUN 4.3±0.5 mg/dLおよびシスタチンC 0.07±0.03 mg/Lであった。尿量は840±400 mL、尿中排泄量はTP 3.3±1.9 mg/kg/day、Cre 22.7±3.32 mg/kg/day、BUN 141.1±23.8 mg/kg/dayおよびNAG 0.23±0.28 U/kg/dayであった。PCioは115.9±30.4 mL/minであった。ヒトにおけるPCioは平均127 mL/min (Krutzen, E. et al., J. Lab. Clin. Med., 104, 995-961, 1984.)であり、ミニブタにおいてもほぼ同様の値を示した。血清中シスタチンCおよび尿中NAGは腎機能障害を鋭敏に反映するバイオマーカーとして知られている。今回、我々は正常動物において血清中シスタチンCおよび尿中NAGの基礎データを得た。今後、高齢および腎機能に障害を負荷したミニブタを用いることで、これらのバイオマーカーとしての有用性を検討する予定である。
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| ５． |
ウサギにおけるイヌG-CSFの影響
泉幸子1)、斎藤敏樹2)、上塚浩司2)、山元哲2)、岩田晃2)、土井邦雄2)
1)日生研株式会社、2)一般財団法人日本生物科学研究所
第４０回日本毒性学会学術年会
要旨: 【目的】顆粒球コロニー刺激因子（G-CSF）は、好中球前駆細胞の増殖や分化の促進、また成熟好中球の活性化に作用することが知られている。今回、開発中のイヌのG-CSF製剤をウサギに投与し、末梢血中の好中球（偽好酸球）の変化及び抗原性を調べたので報告する。
【材料及び方法】日本白色種ウサギ（JWY-NIBS、3~4カ月齢）を用い、G-CSF製剤投与群（G群）及びG-CSF製剤とアジュバントの乳化物投与群（GA群）を設定した。G-CSF製剤（2。5μg/kg/day）を9週間にわたって毎週1日1回、2日間連続皮下投与した。各週の第1回投与前（Pre）、第1回投与後24h及び48hに耳介静脈より採血し血液学的検査を、Pre採血時の血清を用いG-CSF抗体価の測定を行った。最終採血後に剖検し、肝臓、脾臓、腎臓、大腿骨（骨髄）を採取し病理組織学的検査を行った。
【結果】G及びGA群において、Preに比して白血球数、偽好酸球百分比の有意な高値あるいは高値傾向がそれぞれ投与1~5週及び投与1~3週に認められた。ELISA抗体価はG群で投与6週以後、GA群で投与3週以後、第1週の値に比して有意な高値を示した。
【考察】抗体価の上昇に伴いG-CSFの作用は徐々に消失し、それはアジュバントにより増強されたことから、G-CSFに対する抗体による干渉が明らかとなった。本実験と同条件で行ったイヌを用いた実験（所内データ）では、約50%のイヌに弱い抗体産生がみられたが投与期間を通じて好中球は増加した。比較対照としたヒトG-GSF製剤投与群では投与5週以後抗体価は上昇し、それに伴いG-CSFの作用は消失した。よって異種動物由来G-CSFを投与した場合、類似した抗体産生過程を示しG-CSFの作用が抑制されると考えられた。実施中の組織学的検査結果も合わせて報告予定である。
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| ６． |
高齢の台湾小耳種豚でみられた副腎髄質の増殖性病変の病理学的解析
上塚浩司1)、鈴木敬之1)、富岡ひとみ1)、チェンバーズ・ジェームズ2)、内田和幸2)、中山裕之2)、土井邦雄1)、布谷鉄夫1)
1)一般財団法人日本生物科学研究所、2)東京大学獣医病理学教室
第154回日本獣医学会学術集会、2012年
要旨:【背景と目的】台湾小耳種豚は、NIBS系ミニブタの起源である３系統の１つである。当所で維持され繁殖が困難となった高齢の台湾小耳種４頭を安楽殺し剖検したところ、全頭の両側副腎髄質に増殖性変化が認められ、それらについて病理組織学的検査、免疫染色、電子顕微鏡観察を行なったので報告する。 【材料と方法】台湾小耳種４頭は雄１頭と雌３頭で、いずれも推定年齢10歳以上。常法に従い副腎のパラフィン切片を作成し、HE染色とクロモグラニンA(CA)、S-100、GFAP、Neurofilament蛋白(NFP)について免疫染色を実施した。さらに、副腎髄質の腫瘍性増殖部の電子顕微鏡観察を行なった。 【結果】副腎髄質の増殖性変化を病理組織学的所見に基づき、結節性過形成(NH)、クロム親和性細胞腫(PC)、悪性クロム親和性細胞腫(MPC)に分類した。免疫染色では正常部を含めいずれの分類の副腎髄質もCAに陽性を示したが、S-100、GFAP、NFPの陽性像は副腎髄質の正常部で観察されたのに対し、NHとPCではほとんど見られず、MPCではごく一部に観察された。電顕観察では、PCで細胞質内にエピネフリン顆粒が観察されたが、MPCでは分泌顆粒を確認できなかった。 【考察】CAの免疫染色で増殖病変が副腎髄質由来であることが確認された。S-100、GFAP、NFPの免疫染色性の違いは、NH／PCとMPCとの間での、髄質細胞以外の成分の増殖の程度を反映した結果と推察された。また電顕観察でMPCに分泌顆粒が確認できなかったのは、MPCの脱分化に関連した所見と考察した。豚の副腎髄質の増殖性変化についての報告は非常に少なく、今回の症例は本病変の理解に有用と思われた。
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| ７． |
マラリア原虫における植物ホルモンの網羅的検出と機能解析
松原立真1,2)、川原史也3)、小嶋美紀子4)、田原美智留1)、Andrabi Syed Bilal Ahmad1,5)、
福士路花1,2)、山野安規徳1,2)、榊原均4)、永宗喜三郎1,6)
1)国立感染研・寄生動物、2) 筑波大・院・生命環境、3)一般財団法人日本生物科学研究所､
4)理研・植物科学研究センター、5)慶応大・院・総合医科学研究センター、
6)筑波大・生命環境系
第82回 日本寄生虫学会 （2013年3月）
要旨：マラリア原虫は、トキソプラズマやアイメリアなどと同じアピコンプレクサ生物群に分類される。アピコンプレクサ生物は、進化の過程で藻類の二次共生を経験しており、この共生藻類に由来する色素体（アピコプラスト）を細胞内に保持している。このことを象徴する事実として、同生物群に属するトキソプラズマは「植物ホルモン」を産生してシグナル物質として利用することが判明している。しかし、マラリア原虫においては植物ホルモン産生の直接的な証拠は存在しなかった。
本研究の目的は、マラリア原虫が持つ植物ホルモンを網羅的に検出・定量し、その生物学的な意義を明らかにすることである。今回我々は、マラリア原虫に加えて近縁のトキソプラズマを用い、原虫が産生する植物ホルモンの定量を試みた。その結果、トキソプラズマで存在が知られるサイトカイニン類について、原虫種間で存在量、構成の違いが確認された。また、トキソプラズマでは未検出であった植物ホルモンが数種類同定され、その存在量は原虫種により特徴的な挙動を示した。さらに、新たに検出されたホルモンの一部はマラリア原虫で高濃度に蓄積していることが判明した。このホルモンの機能を解析するため、細菌由来の同ホルモン分解遺伝子を導入することにより欠乏原虫の作出に成功した。現在はこの欠乏原虫を用い、in vitro及びin vivoでの表現型を解析している。本発表ではこの結果についても議論する予定である。 |
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MucoRice-CTB, as oral vaccine for the prevention of enterotoxigenic
E. coli-mediated diarrhea in pigs.
Natsumi Takeyama1,2), Kazuki Oroku1), Daisuke Tokuhara2), Shinya Nagai3),
Hiroshi Kiyono2), Yoshikazu Yuki2)
1)Nippon Institute for Biological Science,
2)Department of Microbiology and Immunology, Institute of Medical Science,
University of Tokyo,3)Nisseiken Co. Ltd.
第16回日本ワクチン学会学術集会（横浜）
Abstract: Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) causes severe diarrhea in both neonatal and weaned pigs. Although the risk of mortality has not reported to be high by the single infection with ETEC, multiple infection exacerbates the diarrheic symptoms. In addition, the prevalence of ETEC in the diarrheic piglets in Japan is the second highest after rotavirus. Vaccination program to reduce risks of ETEC invasion in piglets is requisite.
Cholera toxin B subunit (CTB) has 78% amino acid homology to B subunit of ETEC heat-labile toxin (LT), which is the major cause of diarrhea. Therefore, we selected MucoRice-CTB as a oral vaccine candidate. When orally immunized 2-month-old minipigs or pregnant sows with MucoRice-CTB for four times at 2-week intervals, all of vaccinated minipigs produced CTB-specific mucosal IgA as well as systemic IgG and IgA. The higher amount of CTB-specific IgG and IgA were also secreted to the colostrums and the secreted antibodies were passively transferred to sera of the progeny. All antibodies were also cross-reacted to LTB. To evaluate the efficacy of MucoRice-CTB to the prevention of diarrhea, an intestinal loop assay test with ETEC was performed. As a result, water volumes accumulated in the loops of vaccinated minipigs were significantly reduced than that in control minipigs, indicating that MucoRice-CTB can protect pigs from ETEC-mediated diarrhea.
Our results showed that MucoRice-CTB could be an excellent candidate of oral vaccine to induce both active and passive immunity against ETEC in pigs.
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Establishment of Murine Norovirus-S7 Infection System for Vaccine Development.
Yingju Chen1), Natsumi Takeyama1,2), Yukinobu Tohya3), Yoshikazu Yuki1),
Hiroshi Kiyono1)
1)Division of Mucosal Immunology, The Institute of Medical Science,
The University of Tokyo,
2)Nippon Institute for Biological Science,
3)Department of Veterinary Medicine, College of Bioresource Sciences, Nihon University
平成24年度感染症若手フォーラム（北海道）
Abstract: Norovirus (NV) belongs to the family Caliciviridae, which is a group of small, icosahedral, non-enveloped, positive-strand RNA virus. Over 60% of non-bacterial gastroenteritis outbreaks have been reported to be attributed to human norovirus (HNV), which is a major public health concern worldwide. Due to the lack of HNV cell culture system and animal infection model, progress of vaccine development has been limited. With the discovery of murine norovirus (MNV), which can experimentally replicate both in vivo and in vitro, a great volume of biological information of NV has been revealed. Recently, MNV-S7, a new MNV strain was isolated from laboratory mice in Japan. The classification based on MNV capsid protein (VP1) sequence shows that MNV-S7 is almost identical to other MNV. In this study, we aimed to establish the NV vaccine evaluation system with the stable MNV-S7 infection model, as an alternative approach for our understanding HNV infection and vaccine development. When Balb/cA and C57BL/6J mice were orally inoculated with 7.5 log10 TCID50/dose of MNV-S7, the viral RNA copy numbers and the titers were detected in fecal samples of both mouse strains from 1 day post infection (dpi), although both strains did not show any clinical symptoms. The excretion of MNV-S7 in feces persisted for at least 2 weeks, with peaks between 1 to 5 dpi. After 14 dpi, the viral RNA and titers decreased, which might be attributed to the development of appropriate antigen-specific immune responses. VP1-specific serum IgG, IgA and fecal IgA were induced by 3 weeks after virus challenge in both group of mice. In order to examine whether MNV-S7 can be used as a live oral vaccine, at first Balb/cA mice were orally immunized with MNV-S7 and then challenged with multiple dose of MNV-S7. Orally vaccinated mice with MNV-S7 live virus showed complete protection against homologous virus challenge, because no peaks of viral excretion were observed after the challenge. These results show that we could successfully establish a MNV mouse infection model and assess effectiveness of live MNV oral vaccine.
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豚の小脳.
鈴木敬之
日本生物科学研究所
第53回獣医病理学研修会、2013年
要旨：【動物】豚、101日齢、雄。【臨床事項】症例は繁殖母豚500頭規模の一貫経営農場での飼育豚で、病性鑑定を目的として鑑定殺された。鑑定殺時には起立不能、全身性の痙攣及び眼球震顫の臨床症状を呈していた。【肉眼所見】大脳及び小脳における硬膜の白濁、脳溝部軟膜の混濁、橋右外側から右小脳脚に及ぶ膿瘍形成が認められた。その他の臓器では全身性のリンパ節の腫大、右肺中葉の一部で暗赤色調無気肺領域が見られた。【組織所見】小脳髄膜におけるリンパ球・マクロファージなどの単核細胞の中等度‐重度浸潤、小脳皮質及び髄質における単核細胞の囲管性細胞浸潤並びにリンパ球・マクロファージからなる小肉芽腫病変が多数認められ、多核巨細胞の浸潤も伴っていた。その他臓器では全身のリンパ節におけるリンパ球の減少と肉芽腫性リンパ節炎、多核巨細胞を伴う間質性腎炎、間質性・カタル性気管支肺炎、胃無腺部における潰瘍形成などが認められた。病原因子解析では、PCV2がPCR及びin situ hybridization(ISH)法により小脳及び大脳で検出され、リンパ組織と肺からもPCR, ISH及び免疫染色により検出された。PRRSV, ADV, JEV, PTVは小脳及び大脳では検出されなかった。また大脳及び橋－小脳の膿瘍でArcanobacterium pyogenesが検出された。【診断及び考察】小肉芽腫性病変を伴う豚のリンパ・組織球性髄膜脳炎（PCV2感染の関与を疑う）とした。本症例はPCV2全身性疾患の病態を示しており、中枢神経病変はその病変性状とISHの結果からPCV2が関与する病変と考えられた。既報と比較して本例は巨細胞浸潤が顕著であり、単核細胞浸潤を主体とする髄膜脳炎が重度であった。この要因としては、病態の経過や提出標本近傍の膿瘍で検出されたArcanobacterium pyogenes感染の関与も考えられた。
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GSP系ニワトリに出現したpink-eyed dilution突然変異体の眼病変
渋谷一元1)、山下龍1)、大嶋篤1)、木下圭司2)、水谷誠2)、松田洋一2)
1)日本生物科学研究所、2)名古屋大学院生命農学研究科
第113回日本家禽学会春季大会 (2013)
要旨：【目的】我々は、ファヨウミ種に由来の近交系であるGSP系統ニワトリに出現した不完全アルビノ様個体の遺伝様式を検索し、この病態が常染色体性の単一劣性遺伝子により支配されていることを見出し、本系統をpink-eyed dilution突然変異体(GSP/pe系)と命名した(2009年本学会秋季大会)。今回、GSP/pe系成熟個体に眼球の腫大および突出が認められたことから、眼球を病理学的に検索し、その病態を明らかにすることを目的とした。【方法】典型病変を検索するため、成熟個体である42～68週齢のGSP/pe系ニワトリ雌雄各2羽および対照群としてGSP系ニワトリ雌雄各2羽を検索した。【結果】外観において、GSP/pe系はGSP系に比較して羽装の黒色部の淡明化がみられた。眼球は、軽度の腫大および突出、斜視、眼瞼部皮膚、結膜および虹彩の色素淡明化、不整瞳孔、水晶体混濁・形態異常を示した。剖検において、GSP/pe系全例の眼球（8眼球中6眼球）は高度に硬化しており、割断できなかった。脱灰後に眼球を割断したところ眼内には灰白色充実性硬物質が充満していた。摘出した眼球はブアン液で固定しEDTA脱灰液にて脱灰後に、常法に従ってHE染色標本を作製した。組織学的に、眼内には骨組織（一部軟骨・線維組織）が充満していた。これら骨組織内には免疫組織化学的にチュブリン陽性を示す神経網膜の断片が含まれていた。加えて、骨形成部位では網膜色素上皮が消失していた。骨形成がみられなかった2眼球では、網膜全剥離および変性ならびに網膜色素上皮の局所性の線維性増生が観察された。その他、水晶体の萎縮・変性、虹彩および毛様体の形成不全、脈絡膜の増生、視神経の萎縮が観察された。虹彩後葉、毛様体および網膜の色素上皮層おける色素細胞内の色素の消失あるいは著明な減少、虹彩前葉間質、毛様体実質および脈絡膜間質における色素細胞の消失あるいは減数も観察された。【考察】網膜色素上皮細胞は多様な分化を示すことが知られており、眼内に形成された骨・軟骨組織との関連性を今後検討する必要があると考えられた。
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